PCR實(shí)驗室現存的不足

▲1、PCR實(shí)驗過(guò)程中易發(fā)生污染

① PCR擴增產(chǎn)物的污染。這也是*常見(jiàn)的污染原因。PCR產(chǎn)物經(jīng)反復多次的擴增，其復制量遠遠超過(guò)PCR的檢測極限，所以即使是極微量的污染也足以造成實(shí)驗結果假陽(yáng)性。

② 試劑的污染。在試劑的配制過(guò)程中，接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導致試劑被污染。

③ 待測樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴導致樣品與外界接觸被污染;其次在核酸提取過(guò)程中使用了被污染的移液器或槍頭導致樣品被污染;另外，某些樣品中含有病毒，若彌散到空氣中則有可能形成交叉污染。

④ 氣溶膠污染。若氣溶膠中包含病毒等污染物擴散至空氣中極有可能造成PCR產(chǎn)物污染。氣溶膠是由空氣與液體表面摩擦而產(chǎn)生的，開(kāi)蓋、晃動(dòng)反應管及污染加樣器的反復吸樣都可形成氣溶膠從而導致交叉污染。據計算一個(gè)氣溶膠顆?？珊?8 000 拷貝，因此，應尤其重視由氣溶膠導致污染的問(wèn)題。PCR 實(shí)驗室只要出現了污染，之前的結果報告就變?yōu)闊o(wú)效而且也無(wú)法進(jìn)行其他的實(shí)驗操作。必須找出并徹底清除污染源，才能得到準確有效的實(shí)驗結果。

▲2、實(shí)驗室的質(zhì)量控制存在缺陷

實(shí)驗室的質(zhì)量控制分為：室內質(zhì)量控制和室間質(zhì)量控制。

室內質(zhì)量控制是指實(shí)驗室人員通過(guò)一定的方法和步驟，連續評價(jià)實(shí)驗室工作的可靠程度，旨在監測和控制實(shí)驗室常規工作的精密度，提高實(shí)驗室常規工作中批內、批間樣本檢驗的一致性，以確定測定結果是否可靠及可否發(fā)出報告的一項工作。

室間質(zhì)量控制是指客觀(guān)比較實(shí)驗室的測定結果與靶值的差異，由外部機構采取一定的方法，連續、客觀(guān)地評價(jià)實(shí)驗室的結果，發(fā)現誤差并校正結果，使各實(shí)驗室之間的結果具有可比性。

▲3、規范管理不到位

為了提高實(shí)驗室的檢測質(zhì)量，避免實(shí)驗室污染以及確保實(shí)驗室的生物安全，規范有效的管理是實(shí)現這一切的根本措施。但有時(shí)會(huì )出現管理不到位甚至是疏忽的地方，比如隨意出入實(shí)驗室，甚至逆行;沒(méi)有按照規范穿戴口罩、鞋套;試驗期間緩沖間兩側門(mén)同時(shí)打開(kāi);實(shí)驗完畢后忘記開(kāi)紫外燈消毒等。

pcr實(shí)驗室解決污染辦法

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